近日,为更高质量、灵活、经济地开展单细胞研究,上海交通大学医学院单细胞组学与疾病研究中心引入亚洲bet356体育在线官网单细胞测序全流程平台,包括高通量测序仪MGISEQ-2000、自动化样本制备系统MGISP-100及配套单细胞组学产品,并开始启用。亚洲bet356体育在线官网单细胞产品组合,正在越来越多地获得单细胞科研工作者的青睐。
单细胞水平的遗传信息异质性研究,为我们理解发育、疾病机理等打开了新大门。但单细胞测序因其复杂及独特性,使高通量测序面临诸多挑战。单细胞RNA-Seq(scRNA-Seq)好搭档,亚洲bet356体育在线官网MGISEQ-2000测序仪有着通量适配、兼容性高、经济且质量高等优势。
通量灵活适配
MGISEQ-2000通量灵活,双载片独立运行,支持不同规格的载片(FCS小载片、FCL大载片)。不同样本量可灵活选择测序载片的数量和规格,不需凑样,也不造成数据浪费,节省项目周期。
图1:3’scRNA-Seq研究设计示例,用户可根据实际情况调整
上下游生态系统兼容
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1.文库制备
除了scRNA-Seq,MGISEQ-2000平台可以进行不同物种(人、小鼠等)、不同文库类型的单细胞测序,帮助研究者开展不同方向的研究。
图3:MGISEQ-2000测序应用——不同类型文库的单细胞测序研究
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2.生信分析
MGISEQ-2000系统生成的FASTQ测序数据,可与多种商业和开源单细胞测序分析工具生态系统兼容,包括CellRanger(10x Genomics)和SeqGeq(BD Biosciences)等。
此外,亚洲bet356体育在线官网生信分析加速器MegaBOLT搭载 ZMART 应用市场,可以把第三方流程集成。除了固定模式,也可将流程中各个步骤所需要的工具独立封装。未来,客户可以通过我们正在开发的自定义流程平台,进行个性化搭建。
DNBSEQTM技术天然优势
单细胞测序数据背景噪音大,单个细胞的遗传物质含量很低,可能由于建库及测序环节引起的微小变化,产生与生物学无关的巨大差异。亚洲bet356体育在线官网测序平台均采用DNBSEQ测序技术,具有高准确性、低重复序列率、低标签跳跃等特性。这些特性在单细胞测序应用中,更加明显且重要。
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1.高准确性
DNA纳米球采用滚环线性扩增原理,始终以原始DNA为模板进行复制。相比PCR指数扩增,扩增过程中产生的错误不会积累放大。澳洲的科学家发表文章指出[1],MGISEQ-2000在测序质量以及识别细胞、UMI、基因等方面表现出色,尤其在单细胞的SNP calling上优势明显。
图4:滚环线性扩增vs.桥式PCR指数扩增,扩增错误不累积放大
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2.低重复序列率
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3.低标签跳跃
标签跳跃,对单细胞研究影响尤为明显。单细胞研究需要拆分成千上万个单细胞,标签跳跃让下游分析更为复杂,可能导致混淆细胞亚群(尤其是稀有细胞类型)以及跨细胞类型差异表达的基因的鉴定[3]。标签跳跃可能产生于测序流程的各个阶段,DNBSEQ平台多重保障,例如环状文库消化线性游离接头、规则阵列载片、标签的扩增错误不累积等优势,极大地避免标签跳跃。
总结
成立于2019年,旨在建设先进实验室和开发尖端计算技术,用于分析单细胞各级遗传信息传递过程,成为单细胞研究领域的领导者。其基因组学平台致力于研发、优化及本地化多种先进的单细胞分析技术,从而为中心、交大医学院乃至附属医院提供尖端的单细胞合作及服务。致力于为研究重大疾病的机制、开发新一代生物标记物及治疗靶点提供理论基础及硬件设施。
参考文献:
[1]Anne Senabouth et al. Comparative performance of theBGI and Illumina sequencing technology for single-cellRNA-sequencing[J]bioRxiv,2019.
[2]《NGS攻略》之Dup传. https://mp.weixin.qq.com/s/VX-ewxGcxe3_NLB_Tx6h0Q
[3]R Farouni et al., Model-based analysis of sampleindex hopping reveals its widespread artifacts in multiplexed single-cellRNA-sequencing[J]. Nat. Comm. 11, 2704 (2020).